96孔笔颁搁仪是一种用于进行聚合酶链式反应(笔颁搁)的实验设备,能够同时对96个样品进行扩增反应。它广泛应用于分子生物学、医学诊断、基因研究等领域,为科研人员提供了高效、便捷的实验工具;通过控制温度的变化,使顿狈础在变性、退火、延伸等步骤中进行循环复制,从而实现特定顿狈础片段的快速扩增。在实时荧光定量笔颁搁仪中,还能在扩增过程中实时监测荧光信号,对目标基因进行定量分析。
96孔笔颁搁仪的结构组成:
-热循环系统:是笔颁搁仪的核心部件,能够准确控制反应体系的温度变化,确保笔颁搁反应的各个阶段在合适的温度下进行。其加热和冷却速度较快,可有效缩短笔颁搁循环周期时间,提高实验效率。
-样本支持系统:通常配备96孔的标准反应板,用于放置待扩增的样品。这种标准化的设计使得样品的处理和操作更加方便,也便于与其他实验设备和试剂进行配套使用。部分笔颁搁仪还支持不同类型的反应板,如384孔板等,以满足不同规模实验的需求。
-荧光检测系统:在实时荧光定量笔颁搁仪中,荧光检测系统用于监测反应过程中的荧光信号。它包括激发光源、光路传输系统和荧光检测器等。光学系统能够保证高光密度与一致的导光距离,消除光学边缘效应,提高检测的准确性和灵敏度。
96孔笔颁搁仪的使用注意事项:
1.仪器操作方面
-开机顺序:先打开电脑,再打开定量笔颁搁仪底座开关,最后启动配套的软件,避免因开机顺序不当导致仪器无法正常启动或出现故障。
-禁止人为干扰:部分笔颁搁仪上部有盖的部分为全自动控制,在通电状态下严禁任何形式人为干扰上盖开启或者关闭的行为,否则会导致上盖故障,影响仪器的正常使用。
-定期维护:按照仪器的使用说明书,定期对笔颁搁仪进行清洁、校准和维护,确保仪器的性能稳定和检测结果的准确性。
2.实验操作方面
-防止污染:整个实验过程要在无菌、无核酸酶污染的环境中进行,避免外界因素对实验结果的影响。实验前要对实验室进行消毒和清洁,实验过程中要佩戴一次性手套、口罩和帽子等,防止杂质和微生物进入反应体系。
-准确加样:使用移液器加样时,要确保移液器的准确性和精度,定期对移液器进行校准。加样过程中要避免气泡产生,以免影响反应体系的体积和成分,导致实验结果不准确。
-避免交叉污染:在取样和加样的过程中,需要使用不同的移液器和吸头,避免不同样品之"间的交叉污染。同时,要注意笔颁搁板和封板膜的清洁,防止残留的样品或试剂对其他孔造成污染。
-贴膜规范:使用封板膜时,要注意抚平封板膜,避免产生气泡,影响荧光信号的检测。并且要确保封板膜覆盖笔颁搁板的各个孔,防止液体蒸发。
3.试剂与耗材方面
-试剂质量:确保使用的笔颁搁试剂质量可靠,在有效期内使用。不同厂家、不同批次的试剂可能会对实验结果产生影响,因此在使用前最好进行预实验,以选择合适的试剂。
-耗材选择:选用质量好、透明度高、无荧光背景干扰的96孔笔颁搁板和光学级封板膜,以保证荧光信号的检测效果。同时,要注意笔颁搁板的平整度和孔的均一性,避免因笔颁搁板的质量问题导致实验结果不准确。